Dầu ngâm: thành phần, đặc điểm, nền tảng và sử dụng

Dầu ngâm là một chất lỏng nhớt và trong suốt có chỉ số khúc xạ cao. Vì lý do này, nó được sử dụng rộng rãi trong các quan sát bằng kính hiển vi, vì nó cung cấp đặc tính tập trung ánh sáng khi truyền qua vật kính 100X của kính hiển vi, làm tăng khả năng phân giải của nó.

Điều này xảy ra do sự hình thành của một màng nhớt giữa mục tiêu và vết bẩn, ngăn các tia sáng phát tán khi chúng chạm vào không khí, tập trung các chùm ánh sáng về phía mẫu.

Dầu ngâm chỉ được sử dụng với mục tiêu 100X. Đó là lý do tại sao mục tiêu 100X còn được gọi là mục tiêu ngâm. Phần còn lại được gọi là mục tiêu khô. Mục tiêu này không thể được sử dụng mà không có dầu ngâm, bởi vì không có nó, hình dung sẽ không thỏa đáng.

Chức năng chính của dầu ngâm là cung cấp hình ảnh rõ ràng hơn, sắc nét hơn và rõ hơn, cho phép quan sát các chi tiết không thể thực hiện được với các mục tiêu khác.

Dầu đầu tiên được sử dụng cho mục đích này là dầu hồi, được sử dụng cùng với ống kính ngâm đầu tiên được tạo ra bởi Giovanni Battista Amici. Điều này chỉ tránh quang sai màu, nhưng nó không làm tăng khẩu độ số của hệ thống ống kính.

Sau đó, dầu tuyết tùng đã được sử dụng, nhưng nó có nhiều nhược điểm khiến nó không được sử dụng. Trong số đó là tính axit cao của nó, làm hỏng các mục tiêu trong thời gian ngắn.

Sau đó, các chất khác như nước và glycerin đã được sử dụng cho đến khi dầu ngâm tổng hợp được tạo ra, dần dần được tinh chế cho đến khi đạt đến dầu ngâm hiện tại, một hợp chất phức tạp của các chất hữu cơ.

Thành phần của dầu ngâm

Dầu ngâm được cấu thành bởi một hỗn hợp các hợp chất hữu cơ như: terphenyl, terphenyl hydro hóa, hydrocarbon tự nhiên và polybutenes.

Đặc tính dầu ngâm

Dầu ngâm là một chất lỏng màu vàng nhạt, bề ngoài hơi nhớt, có mùi và mật độ đặc trưng trong khoảng 0, 92 đến 0, 99 g / cm3.

Dầu ngâm không tan trong nước và có nhiệt độ sôi 340 ° C. Chỉ số khúc xạ a (n 20 ° C / D): nằm trong khoảng từ 1.482 - 1.516. Nhiều như vậy, chỉ số viêm là 110 ° C và độ nhớt dao động trong khoảng từ 100 đến 120 mPa.s.

Sản phẩm này phải được xử lý đúng cách, vì nó là ecotoxic. Đó là, nó có hại cho môi trường, chủ yếu ảnh hưởng đến động vật thủy sản. Mặt khác, nó gây kích ứng da và niêm mạc. Nếu ăn vào, nó là độc thận và gây độc cho tim.

Dầu ngâm ổn định ở 15 đến 25 ° C, nhiệt độ phải được bảo quản.

Khái niệm cơ bản về dầu ngâm

Khi sử dụng ống kính có độ phóng đại cao hơn, cường độ ánh sáng nên được tăng lên. Tuy nhiên, nhiều chùm ánh sáng bị mất vì chúng bị tán xạ khi chúng chạm tới không khí (không gian giữa lớp phủ và thấu kính), và thậm chí một số tia phải chịu sự phản xạ toàn phần.

Dầu ngâm có chỉ số khúc xạ tương tự như thủy tinh. Do đó, khi dầu được tiếp xúc giữa ống kính 100X và lớp phủ, các chùm sáng được tập trung.

Các tia tập trung xuyên qua mẫu và tăng độ sắc nét của hình ảnh, nghĩa là tăng khẩu độ số của vật kính và hiệu chỉnh quang sai màu và hình cầu.

Sử dụng hoặc ứng dụng

Việc sử dụng dầu ngâm đặc biệt cần thiết khi cần phải quan sát hình ảnh theo cách rộng hơn, sử dụng mục tiêu phóng đại lớn hơn (mục tiêu 100X) và do đó có thể thấy các chi tiết cần thiết để chẩn đoán.

Do đó, nó được sử dụng rộng rãi trong các nghiên cứu kính hiển vi của các lĩnh vực khác nhau như: mô học, tế bào học, huyết học và vi khuẩn học. Ví dụ, rất hữu ích cho việc nghiên cứu các đặc điểm của tế bào và mô của bệnh nhân.

Nó cũng phục vụ cho việc phân tích phết máu, nơi chúng tôi muốn nêu chi tiết các đặc điểm của hemoparaite bên trong và bên ngoài hồng cầu, cũng như trong các chế phẩm Gram, để xác định các đặc điểm hình thái của vi sinh vật.

Nó thường được sử dụng trong các chế phẩm cố định, vì nó không được khuyến khích trong các chế phẩm tươi. Điều này là do sức căng bề mặt của dầu làm cho lớp phủ di chuyển, khiến mẫu di chuyển trong quá trình quan sát và ngăn cản sự phân tích của nó.

Mặt khác, dầu ngâm không chỉ hữu ích trong kính hiển vi quang học thông thường: nó còn được sử dụng trong kính hiển vi huỳnh quang phản xạ nội toàn phần (TIRFM) và trong các ứng dụng huỳnh quang đồng tiêu.

Các bước để quan sát một chế phẩm sử dụng dầu ngâm

Để xem chuẩn bị kính hiển vi, trước tiên hãy tập trung vào việc chuẩn bị với mục tiêu độ phóng đại thấp hơn, thường là 10X, với cường độ ánh sáng thấp.

Sau đó, mục tiêu của 40X được thông qua, và ánh sáng đi qua được tăng lên một chút. Một số phân tích có thể được thực hiện với mức tăng này, nhưng để xem chi tiết cấu trúc, bạn cần phóng đại 100X.

Trước khi đi đến vật kính 100X, một giọt dầu ngâm được đặt trên lớp phủ, ngay nơi bạn muốn quan sát, và sau đó khẩu súng lục của kính hiển vi di chuyển để xác định vật kính 100x trong quá trình chuẩn bị.

Cường độ của ánh sáng được điều chỉnh (tăng) (di chuyển bình ngưng và mở màng ngăn). Sau đó, với một số chuyển động nhỏ được cung cấp cho vít micromet (tiến hoặc lùi) sẽ lấy nét hoàn hảo nếu kính hiển vi sử dụng các mục tiêu parafocal.

Nếu bạn cố gắng tập trung chuẩn bị trực tiếp với mục tiêu ngâm, có thể có vấn đề trong việc tìm trọng tâm. Đó không phải là một hành động bất khả thi, nhưng khó khăn tăng lên đáng kể.

Chăm sóc

Để sử dụng dầu ngâm, phải tính đến một số điều kiện.

Khi một chế phẩm màu đã được thực hiện, chẳng hạn như vết bẩn được nhuộm bằng Giemsa hoặc Gram, cần phải chờ cho vết bẩn khô hoàn toàn trước khi đặt dầu ngâm. Mặt khác, dầu cùng với nước sẽ tạo thành các mixen không cho phép chuẩn bị được trực quan hóa.

Mặt khác, sau khi quan sát lô chế phẩm, nghĩa là vào cuối ngày làm việc, mục tiêu 100X cần được làm sạch cẩn thận, sử dụng giấy cho ống kính ethanol. Nếu ống kính bị bẩn, dầu sẽ khô trên đó và sau đó sẽ rất khó để loại bỏ nó, làm hỏng trường nhìn.

Tương tự như vậy, phải tính đến việc dầu dễ cháy và phải tránh xa các nguồn nhiệt (bật lửa). Điều quan trọng là tránh làm nóng nó trên 65 ° C.

Cuối cùng, dầu là một sản phẩm độc hại. Do đó, nên tránh tiếp xúc trực tiếp với da và niêm mạc, nơi có thể gây kích ứng nhẹ. Để tránh tai nạn, nên sử dụng găng tay và kính an toàn để thao tác.

Trong trường hợp tiếp xúc với dầu, khu vực này nên được rửa bằng nhiều nước. Nếu dầu bắn vào mắt, cần rửa sạch theo cách tương tự, giữ cho mắt mở. Trong trường hợp vô tình nuốt phải, điều quan trọng là phải uống nước ấm và gây nôn, ngoài việc đi đến bác sĩ gần nhất.