Kiểm tra chéo: chúng dùng để làm gì, kỹ thuật và nền tảng, các giai đoạn

Các xét nghiệm chéo là một loạt các nghiên cứu trong phòng thí nghiệm được thực hiện để xác định xem các sản phẩm máu từ người hiến (chủ yếu là máu toàn phần và cô đặc hình cầu) có tương thích với máu của người nhận hay không.

Đây là một thử nghiệm bổ sung ngoài khả năng tương thích ABO và yếu tố Rh. Lý do để kiểm tra chéo là đôi khi hai cá nhân (người nhận - người nhận) có thể có cùng nhóm ABO và Rh nhưng máu của họ vẫn không tương thích.

Sự không tương thích như vậy là do sự hiện diện của các kháng thể chống lại một loạt các protein hồng cầu được gọi là kháng nguyên nhỏ. Những kháng nguyên này không được đánh giá thường xuyên như được thực hiện với nhóm máu (ABO) và yếu tố Rh.

Điều này là do các kháng nguyên nhỏ ít gặp hơn và có biểu hiện thay đổi ở mỗi cá nhân, do đó hầu như không thể nhóm chúng theo các loại như được thực hiện với nhóm và yếu tố Rh.

Thay vào đó, các tế bào hồng cầu của người hiến được trộn với huyết thanh của bệnh nhân (xét nghiệm tương thích chính) và tế bào hồng cầu của bệnh nhân với huyết thanh của người hiến (xét nghiệm tương thích nhỏ) để phát hiện sự hiện diện của phản ứng kháng nguyên-kháng thể.

Khi có kháng thể chống lại các kháng nguyên nhỏ, trong huyết thanh của bệnh nhân hoặc của người hiến, xét nghiệm được cho là dương tính, do đó, trong hầu hết các trường hợp, đơn vị máu cụ thể không thể truyền được.

Tập đoàn ABO

Để hiểu rõ rằng các phản ứng chéo được xử lý trước tiên, cần phải biết những điều cơ bản về các nhóm máu.

Theo nghĩa này, điều quan trọng nhất là phải biết rằng máu có thể được phân thành bốn nhóm: A, B, AB và O.

Mỗi nhóm này biểu hiện trên bề mặt tế bào hồng cầu một loại protein (kháng nguyên) cụ thể, được xác định là một yếu tố lạ bởi các kháng thể của một thụ thể tiềm năng của một nhóm khác nhau.

Điểm nổi bật nhất của các phản ứng kháng nguyên-kháng thể trong khả năng tương thích máu là không cần tiếp xúc với kháng nguyên trước đó để kháng thể tồn tại. Điều này được gọi là kháng thể tự nhiên.

Kháng thể tự nhiên

Nói chung, để các kháng thể tồn tại trong cơ thể của một cá nhân, điều cần thiết là các tế bào bạch cầu đã được tiếp xúc với kháng nguyên trước đó.

Điều này có nghĩa là tại lần tiếp xúc đầu tiên giữa kháng nguyên nước ngoài và sinh vật không có kháng thể, vì chúng được tạo ra sau đó, sau lần tiếp xúc ban đầu. Do đó, hệ thống miễn dịch không thể có kháng thể chống lại một loại virus cụ thể, nếu nó không được tiếp xúc với nó trong quá khứ.

Ngoại lệ duy nhất ở trên là các kháng nguyên chống AB. Trong những trường hợp này, người này có kháng thể chống lại kháng nguyên mà các tế bào hồng cầu của họ không có ngay cả khi họ chưa từng tiếp xúc với các tế bào hồng cầu của người khác. Điều này được gọi là kháng thể tự nhiên.

Kháng nguyên và kháng thể liên quan đến nhóm máu

Các nhóm máu được xác định trong trường hợp hệ thống ABO bằng sự hiện diện của các kháng nguyên cụ thể (A hoặc B) trong màng tế bào hồng cầu và ngược lại, các kháng thể chống lại kháng nguyên vắng mặt trong màng hồng cầu.

Do đó, một người có nhóm máu A biểu hiện kháng nguyên A trên bề mặt tế bào hồng cầu của họ, trong khi trong huyết thanh có kháng thể chống B.

Ngược lại, ở những bệnh nhân thuộc nhóm B, kháng nguyên B được tìm thấy, trong khi kháng thể là kháng A.

Bây giờ, bệnh nhân có máu AB có cả kháng nguyên A và B. Do đó, không có kháng thể, vì làm như vậy sẽ phá hủy các tế bào hồng cầu của người đó.

Điều ngược lại xảy ra ở nhóm O, trong đó màng hồng cầu không có bất kỳ kháng nguyên nào trong số hai kháng nguyên (không phải A hay B), trong khi trong huyết thanh có kháng thể chống A và kháng B.

Không tương thích nhóm ABO

Từ những điều trên, khả năng tương thích của các nhóm máu ABO có thể dễ dàng được suy ra, vì kháng nguyên của màng hồng cầu được tự động biết đến các kháng thể trong huyết thanh. Vì vậy:

- Máu A tương thích với nhóm A và nhóm O.

- Nhóm máu B tương thích với nhóm máu B và O.

- Những người có nhóm O chỉ có thể nhận được máu O (vì họ có kháng thể chống A và chống B), mặc dù tất cả các nhóm khác đều nhận được máu mà không gặp vấn đề gì vì nó thiếu kháng nguyên.

- Cuối cùng. Những người có nhóm máu AB có thể nhận máu từ tất cả các nhóm khác (A, B, O và tất nhiên AB), vì họ không có kháng thể chống lại bất kỳ kháng nguyên nào. Tuy nhiên, chỉ những người AB mới có thể nhận được máu AB, vì tất cả các nhóm khác có kháng thể sẽ phá hủy các tế bào hồng cầu này.

Kháng nguyên nhỏ

Cũng như các nhóm ABO, một loạt các protein có chức năng kháng nguyên có thể được tìm thấy trên bề mặt hồng cầu, như trường hợp với các kháng nguyên của nhóm ABO.

Tuy nhiên, những kháng nguyên này không xảy ra ở tất cả các cá nhân. Sự kết hợp của nó là không đồng nhất và sự xâm nhập (mức độ biểu hiện của protein) là khác nhau, do đó không thể phân loại theo các nhóm như nhóm tồn tại cho ABO và Rh. Từ đó, nó bắt nguồn từ tên "kháng nguyên nhỏ", còn được gọi là "kháng nguyên có tỷ lệ mắc thấp".

Mặc dù chúng không thường xuyên, nhưng có thể có các kháng thể tự nhiên chống lại các kháng nguyên nhỏ. Trong số đó phổ biến nhất là Lewis, MNSs, anti N, Kell, Duffy, anti Fyb và Kidd. Tất cả đều chịu trách nhiệm cho các phản ứng tan máu và sau truyền máu rất nghiêm trọng.

Ngoài ra, có thể có trường hợp mẫn cảm với các kháng nguyên nhỏ do tiếp xúc trước đó, hoặc với các protein kháng nguyên nói trên do truyền máu trước đó hoặc do miễn dịch chéo.

Miễn dịch chéo

Người ta nói rằng có khả năng miễn dịch chéo khi hai kháng nguyên từ hai nguồn khác nhau (ví dụ như hồng cầu và vi khuẩn) rất giống nhau, đến mức các kháng thể chống lại một trong những protein kháng nguyên nói trên cũng phản ứng với nhau vì chúng gần như giống hệt nhau. .

Để hiểu rõ hơn, hãy lấy ví dụ giả thuyết trước đây (kháng nguyên của hồng cầu và vi khuẩn). Trong cả hai trường hợp không có kháng thể tự nhiên tồn tại, nhưng nếu một người tiếp xúc với vi khuẩn, họ sẽ tạo ra kháng thể chống lại nó.

Các kháng thể như vậy sẽ phản ứng sau đó chống lại hồng cầu nếu các kháng nguyên của loại này rất giống với các vi khuẩn gây ra sự hình thành các kháng thể.

Nếu điều này xảy ra, các tế bào hồng cầu có protein kháng nguyên đặc biệt đó không thể được cung cấp cho người có kháng thể, vì sẽ có sự từ chối. Đây là tầm quan trọng của các phản ứng chéo.

Các bài kiểm tra chéo là gì?

Vì không thể mô tả máu của các cá thể khác nhau trong các nhóm dựa trên các kháng nguyên nhỏ, nên cách duy nhất để biết nếu trong máu của người có kháng thể chống lại các kháng nguyên nhỏ của các tế bào hồng cầu của người khác là thông qua các xét nghiệm chéo .

Trong những trường hợp có kháng thể, phản ứng tan máu hoặc ngưng kết được kích hoạt, do đó kết luận rằng phản ứng là dương tính; đó là, có các kháng thể chống lại các kháng nguyên nhỏ (mặc dù nó không được biết chính xác là gì). Nếu không, xét nghiệm là âm tính.

Nền tảng

Các xét nghiệm chéo dựa trên phản ứng kháng nguyên-kháng thể. Do đó, với chúng, có thể phát hiện xem trong huyết thanh của thụ thể có kháng thể chống lại các kháng nguyên của tế bào hồng cầu của người hiến tặng (hay ngược lại) tạo ra phản ứng kháng nguyên-kháng thể.

Nếu không có kháng thể, không có phản ứng xảy ra và xét nghiệm được báo cáo là âm tính. Ngược lại, nếu phản ứng dương tính (có tan máu hoặc ngưng kết trong quá trình xét nghiệm) thì có thể kết luận rằng các kháng thể có mặt.

Về vấn đề này, điều quan trọng cần lưu ý là có thể có kháng thể chống lại các tế bào hồng cầu trong cả huyết thanh của người cho và người nhận. Đây là lý do có hai loại phản ứng chéo.

Các loại phản ứng chéo

Có thể có kháng thể chống lại hồng cầu của người hiến trong huyết thanh của bệnh nhân; nhưng điều ngược lại cũng có thể đúng, đó là các kháng thể trong huyết thanh của người hiến chống lại các tế bào hồng cầu của bệnh nhân.

Đó là lý do tại sao có hai loại kiểm tra chéo:

- Kiểm tra chéo lớn hơn.

- Kiểm tra chéo nhỏ.

Cả hai loại đều được thực hiện thường xuyên trong ngân hàng máu trước khi truyền các sản phẩm máu, cho rằng nếu bất kỳ xét nghiệm nào dương tính, có nguy cơ cao phản ứng truyền máu có thể gây nguy hiểm đến tính mạng của bệnh nhân.

Kiểm tra chéo lớn hơn

Trong thử nghiệm này, nó được đánh giá xem có kháng thể chống lại các tế bào hồng cầu của người hiến tặng trong huyết thanh của người nhận hay không.

Nếu điều này xảy ra, các sản phẩm máu không thể được quản lý, vì một số lượng lớn các chất chống lại cơ thể có trong huyết tương của bệnh nhân sẽ phá hủy rất nhanh các tế bào hồng cầu của người hiến tặng, tạo ra các phản ứng thảm khốc trong cơ thể người nhận trong quá trình này. Những phản ứng này nghiêm trọng đến mức có thể đe dọa cuộc sống của bạn.

Kiểm tra chéo nhỏ

Trong trường hợp này, nó được xác định nếu có kháng thể trong huyết thanh của người hiến chống lại các tế bào hồng cầu của người nhận.

Nếu vậy, các kháng thể sẽ bắt đầu phá hủy hồng cầu của thụ thể. Tuy nhiên, vì số lượng kháng thể bị hạn chế, phản ứng có cường độ ít hơn; mặc dù nó vẫn nguy hiểm

Các giai đoạn

Cả hai bài kiểm tra chéo chính và phụ được chia thành ba giai đoạn:

- Salina.

- Nhiệt hoặc ủ.

- Coombs.

Trong giai đoạn đầu tiên, các tế bào hồng cầu và huyết thanh được trộn trong nước muối. Sau đó, albumin được thêm vào, và mẫu được ủ ở 37 độ C trong 30 phút để cuối cùng tiến hành giai đoạn coombs.

Kỹ thuật

Kỹ thuật xét nghiệm chéo tương đối đơn giản, vì nó liên quan đến việc thêm tế bào hồng cầu của người hiến vào huyết thanh của bệnh nhân (xét nghiệm chéo chính) cũng như hồng cầu của người nhận vào huyết thanh của người hiến (xét nghiệm chéo nhỏ).

Để tạo ra phản ứng kháng nguyên-kháng thể trong một thời gian tương đối ngắn, phải thực hiện một loạt các bước chuẩn hóa. Các bước này được tóm tắt một cách đơn giản dưới đây.

Điều quan trọng cần lưu ý là trong phần sau đây, xét nghiệm tương thích lớn hơn được mô tả, mặc dù các bước là giống nhau cho xét nghiệm tương thích nhỏ, nhưng trao đổi nguồn gốc của hồng cầu và huyết thanh.